猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2的原核表达及单克隆抗体的制备
2010-10-28分类号：S852.65
【部门】云南农业大学动物科学技术学院
【摘要】以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为模板,通过RT-PCR扩增编码非结构蛋白2(Nsp2)的基因,插入到pET32a表达载体中并在大肠埃希氏菌中进行表达。SDS-PAGE电泳结果显示融合表达的Nsp2分子量约为68 kDa,Western blotting分析该融合蛋白能与PRRSV阳性血清发生特异性反应。纯化融合表达产物Nsp2,按100μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化,经腹腔免疫BALB/c小鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以Nsp2和His-Tag为抗原,通过间接EL ISA方法对融合细胞的上清液进行检测,筛选阳性克隆。经过3次亚克隆后,最终得到了6株能稳定分泌...
【关键词】猪繁殖与呼吸综合征病毒 非结构蛋白2 单克隆抗体
【基金】云南省教育厅科学研究基金项目(08Y0167); 云南省高端科技人才引进计划项目(2009C1125); 云南省现代农业生猪产业技术体系建设项目(云财农[2009]171号)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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