口蹄疫病毒O/HN/93疫苗株的拯救及病毒活性鉴定
2010-06-28分类号:S852.65
【部门】中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室 甘肃农业大学动物医学院
【摘要】利用定点突变方法,构建含有预期突变的口蹄疫病毒O/HN/93株全长cDNA克隆,将全长cDNA的重组质粒线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,转染细胞盲传至第3代50 h后出现典型致细胞病变效应(CPE),第4代10 h出现典型的CPE。对收获的病毒分别用RT-PCR、分子标签测序、间接免疫荧光和电镜观察等进行鉴定,均证实成功拯救到了O/HN/93株FMDV。成功获得O/HN/93株的感染性分子克隆,为进一步研究抗原谱广、免疫原性好的候选疫苗株奠定了骨架基础。
【关键词】口蹄疫病毒 疫苗株 感染性cDNA克隆 病毒拯救
【基金】国家支撑计划(2006BAD06A12); 国家“973”项目(2005CB523201)
【所属期刊栏目】华北农学报
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