北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达
2010-07-15分类号：S831
【部门】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 蚌埠医学院检验系 蚌埠医学院生物科学系 内蒙古农业大学动物科学与医学院
【摘要】利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中。转染后24、48和72h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%～53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中。随表达量...
【关键词】北京油鸡 SMARTcDNA文库 purH基因
【基金】国家863计划项目(2006AA10Z198,2007AA10Z170); 国家自然科学基金项目(30671539); 安徽省省级自然科学研究项目(KJ2009B255Z)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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