新西兰白兔γ-干扰素在昆虫细胞中的表达及其活性测定
2010-06-28分类号：S829.1
【部门】江苏省农业科学院兽医研究所 农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心 江苏省动物疫病预防控制中心
【摘要】用RT-PCR方法对ConA刺激后的新西兰白兔外周血淋巴细胞(PBMC)扩增家兔γ-干扰素(IFN-γ)基因并进行测序,测序结果显示,与GenBank公布的序列核苷酸同源性达到99.4%～99.6%,氨基酸同源性为98.8%～99.4%;然后通过克隆、转化将家兔γ-干扰素基因转入转移载体pFastBacTM1,得到重组转移载体pFastBacTM1-IFN-γ,用pFastBacTM1-IFN-γ转化含有穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经筛选得到重组穿梭载体Bacmid-IFN-γ,用此质粒转染Sf9昆虫细胞,得到重组病毒rAcV-Bac-IFN-γ,经RT-PCR鉴定...
【关键词】家兔 γ-干扰素 克隆 重组杆状病毒
【基金】农业部公益性行业科研专项(nyhyzx07-040); 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(nycytx-44)
【所属期刊栏目】华北农学报
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