睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒生产转基因兔的研究(英文)
2010-12-28分类号：S829.1
【部门】石河子大学动物科技学院 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所 四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所 四川农业大学原子能农业应用研究室 南京晓庄学院生命科学系
【摘要】为探讨直接用注射器对睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒转染兔的精子细胞和卵母细胞,建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择5只成年新西兰雄兔、29只经产新西兰雌兔,每侧睾丸和卵巢内分别打点注射0.5~0.8 mg/mL质粒0.25 mL。①第3周随机取一只雄兔睾丸做冰冻切片,于荧光显微镜下观察转染情况。②(Ⅰ:1#♂×7♀、Ⅱ:2#♂×7♀、Ⅲ:3#♂×7♀、Ⅳ:4#♂×7♀)其它雄兔于第6周和第7周与3日前做过卵巢注射并超排处理的雌兔配种,最后采集新生仔兔耳组织,提取基因组DNA,经PCR和Southern杂交检测阳性率。结果显示雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下...
【关键词】打点注射 睾丸注射 卵巢注射 转基因兔
【基金】Hi-Tech Research and Development Program (863)of China(2008AA101011); Foundation for the 11th FiveYear Program of China(2006BAD01A11); National Natural Science Foundation of China(30860193); the National Hi-important Transgenic Program of China(2009ZX08008-001B)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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