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牛myf6基因真核表达载体的构建及在成肌细胞中的表达

2010-07-08分类号:S823;Q78

【作者】汤展毅  严云勤  高学军  陆黎敏  朱丹丹  冀志庚  
【部门】东北农业大学生命科学与生物技术研究中心  
【摘要】【目的】构建牛myf6基因真核表达载体,并观察myf6真核表达载体转染鲁西黄牛成肌细胞后基因的表达和细胞形态的变化。【方法】在质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点插入myf6基因构建真核表达载体pIRES2-EGFP-myf6,用脂质体技术转染鲁西黄牛成肌细胞,通过G418筛选出稳定转染的细胞株。利用Western印记、Real-time PCR技术检测成肌细胞转染前后myf6基因、肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的表达量。【结果】与对照组相比,转染质粒的成肌细胞myf6蛋白和mRNA的表达量提高(P<0.01),肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的mRNA表达量提高(P<0.01)。细胞...
【关键词】牛myf6  稳定转染  成肌细胞
【基金】国家转基因重大专项课题(2008ZX08007-002)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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