均匀设计优化杨属的SRAP—PCR反应体系
2010-03-15分类号：S792.11
【部门】北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室 河南泌阳县马谷田镇农业服务中心
【摘要】采用均匀设计方法,对影响杨属SRAP-PCR体系的MgCl2、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶和模板浓度等因素分别进行了U16(45)和U12(35)两轮优化,建立了适用于杨属的SRAP-PCR反应体系。在25μL反应体系中,MgCl23.5mmol/L、dNTPs0.20mmol/L、引物0.44μmol/L、TaqDNA聚合酶1.50U、模板浓度28ng/L为最适条件。在此基础上又对退火温度进行了摸索,结果发现,扩增结果对退火温度变化不敏感。最后运用优化体系对杨属3派10个种共16个单株的DNA进行扩增验证,结果获得的DNA条带清晰,多态性比较丰富。说明这一优化的SRAP-PCR反应体...
【关键词】杨属 均匀设计 SRAP--PCR 扩增体系优化
【基金】教育部科学技术研究重大项目(109022); 长江学者专项基金的资助
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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