柑橘无标记转基因转化体系的建立
2010-12-15分类号：S666
【部门】湖南农业大学园艺园林学院 湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室 国家柑橘改良中心长沙分中心 中南林业科技大学生命科学与技术学院
【摘要】采用1个结合化学诱导系统XVE和位点专一性重组系统Cre/LoxP的标记基因剔除载体,对柑橘进行无标记转基因研究.此载体可通过β-雌二醇诱导表达系统控制重组酶系统Cre基因表达来剔除标记基因nptⅡ.将侵染后糖橙节间茎段接种在(MS+3mg/LBA)培养基上,共培养(暗培养)3d后转移到筛选培养基(MS+75mg/LKan+500mg/LCef)中.在筛选抗性再生芽后,切下带1～2mm外植体的抗性芽,转移至含有β-雌二醇的化学诱导培养基(MS+3mg/LBA+500mg/L头孢霉素+2μmol/Lβ-雌二醇)上诱导,15d后用荧光显微镜观察,成功观测到绿色荧光.进行试管嫁接,30d后,提取接穗...
【关键词】柑橘 无标记转基因体系 化学诱导 标记基因 β-雌二醇
【基金】国家农业部“948”专项(2010-Z47); 国家转基因专项(JY04-B-02); 作物种质创新与资源利用重点实验室科学基金开放项目(62162021200014)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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