枣选择性扩增微卫星体系的建立及优化
2010-02-15分类号:S665.1
【部门】中国林业科学研究院林业研究所/国家林业局林木培育重点实验室
【摘要】【目的】建立和优化枣的选择性扩增微卫星(SAM)技术体系,丰富枣群体遗传学研究的方法,同时为枣利用SAM法开发SSR引物提供技术参考和模板。【方法】以冬枣、大荔龙枣和金丝小枣为试材,采用CTAB法提取样品DNA,对SAM试验过程中的酶切-连接、抑制性扩增、预扩增、选择性扩增等关键因子进行研究。【结果】利用PstⅠ和MseⅠ双酶切系统,分步法进行酶切-连接是后续试验成功的关键,抑制性扩增(20.0μL体系)模板取酶切连接液2.0μL,预扩增和选择性扩增(20.0μL体系)的模板分别取上步扩增的稀释产物各2.0μL;抑制性扩增和预扩增反应中,ExTaq取0.5U,反应25个循环,产物稀释20倍进行...
【关键词】枣 选择性扩增微卫星(SAM) 体系建立 优化
【基金】国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD01A1701); 科技部农业科技成果转化资金项目(2008GB24320424); 中国林业科学研究院林业研究所重点项目(ZD200913)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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