香榧ISSR-PCR扩增条件的优化和引物筛选
2010-02-15分类号：S664.5
【部门】浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室 浙江省临安市林业局
【摘要】以香榧Torreya grandis‘Merrillii’基因组DNA为材料,对影响简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)的Taq酶用量、Mg2+浓度、模板DNA用量、磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)浓度和引物浓度等进行了优化试验。优化后的香榧ISSR-PCR扩增体系为:总容积20μL,包括30 ng模板DNA,16.67 nkat Taq酶,0.350μmol.L-1引物,1.625 mmol.L-1 Mg2+,0.250 mmol.L-1 dNTPs,10×PCR buffer 2μL。PCR扩增程序:94℃变性5.0 min;35个循环:94℃变性30 s,退火45 s...
【关键词】经济林学 香榧 ISSR-PCR 引物筛选
【基金】“十一五”浙江省科技计划项目(2008C2200); 浙江省重中之重学科开放基金资助项目(200505,200508,200602)
【所属期刊栏目】浙江林学院学报
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