李果实高质量RNA提取方法的比较和优化
2010-01-31分类号:S662.3
【部门】中国农业大学食品科学与营养工程学院
【摘要】李果实富含酚类和多糖,成熟李果实的总酚和总糖含量分别可达140.28μg/g和80.75mg/g,因此常规方法不能有效提取其RNA以进行分子生物学研究。比较了改良的异硫氰酸胍法、改良的Trizol法、改良的CTAB法和高氯酸盐法提取李果实RNA的效果,结果表明高氯酸盐法效果较好。根据李果实材料的特点,进一步优化了高氯酸盐法,包括用0.1mol/LTris-硼酸缓冲液(pH7.4)取代0.3mol/LTris-HCl缓冲液(pH8.3);提取缓冲液中β-巯基乙醇的浓度由1%提高到2%,可溶性PVP的浓度由8.5%降低至1%;联合使用10%乙醇和醋酸钾以除去多糖;用12000×g离心替代使用填充有...
【关键词】RNA提取 高氯酸盐 李果实 多酚 多糖
【基金】“十一五”国家科技支撑计划重点项目(2006BAD22B01); 国家自然科学基金项目(30600421)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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