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杜仲AFLP反应体系的建立及优化

2010-06-10分类号:S567.19

【作者】王大玮  李煜  周玮  李周岐  
【部门】西北农林科技大学林学院陕西省农业分子生物学重点实验室  
【摘要】【目的】建立并优化适合杜仲的AFLP技术体系,为进一步构建其遗传图谱及开展分子标记辅助育种奠定基础。【方法】对杜仲基因组DNA提取方法、酶切与连接体系、预扩增和选择性扩增程序的影响因素进行分析,并对适合杜仲AFLP分析的引物组合进行筛选。【结果】模板DNA的提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量500 ng,酶切时间6 h,连接反应时间6 h,预扩增产物最适稀释倍数30倍。同时筛选出E-AAG+M-CAA,E-AAG+M-CAT,E-AAG+M-CTA,E-AAG+M-CTG,E-ACA+M-CAA,E-ACA+M-CTA,E-ACC+M-CTG共7对适合杜仲AFLP分析的引物组合。【结...
【关键词】杜仲  AFLP  体系优化  引物筛选
【基金】国家自然科学基金项目(30771751)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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