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甘蓝型油菜BnClo1基因克隆、表达载体的构建及原核表达

2010-02-15分类号:S565.4

【作者】丁勇  常玮  刘小烛  
【部门】西南林学院资源学院  中国科学院昆明植物研究所  
【摘要】【目的】克隆甘蓝型油菜(Brassica napus)油体钙蛋白(caleosin)基因BnClo1,并进行原核表达研究。【方法】在获得甘蓝型油菜BnClo1基因全长cDNA的基础上,根据BnClo1基因编码区设计1对特异引物,以甘蓝型油菜种子总RNA为模板,通过RT-PCR获得了约750bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段克隆到原核表达载体pTYB12中,构建融合表达载体pTYB12-BnClo1,转化到Escherichia coli ER2566(DE3)中进行表达。【结果】测序结果显示,RT-PCR获得的cDNA全长768bp,包含完整的开放阅读...
【关键词】甘蓝型油菜  油体钙蛋白  BnClo1基因  原核表达  pTYB12
【基金】国家自然科学基金项目(30170600); 西南地区生物多样性保护国家林业局重点实验室开放基金项目(KL200704); 西南林学院森林培育云南省重点学科(XK200906)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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