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大豆种子不同发育时期全长均一化cDNA文库的构建

2010-03-15分类号:S565.1

【作者】李晨  闫晓红  周新安  沙爱华  单志慧  周蓉  魏文辉  
【部门】中国农业科学院油料作物研究所基因组学与分子生物学研究室/农业部油料作物生物学重点开放实验室  
【摘要】【目的】为获得大豆种子发育相关基因,并为大豆基因组资源提供材料。【方法】采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)与DSN(duplex-specific nulease)均一化相结合的技术,构建了全长均一化cDNA文库,采用涂平板测定和PCR快速鉴定的技术分析文库质量,用3730测序仪对文库克隆进行测序。【结果】构建了大豆种子不同发育时期全长均一化cDNA文库,最大限度地获得了大豆种子不同发育阶段表达的基因序列,原始文库的库容为6.0×105cfu/mL,重组率接近100%,插入片段大小在0.6—2.0kb之间,平均长度超过...
【关键词】大豆  cDNA文库  均一化技术  表达序列标签
【基金】国家自然科学基金面上项目(30671312); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(20065049)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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