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大豆BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建

2010-01-10分类号:S565.1

【作者】付永平  张君  王丕武  周海涛  曲静  
【部门】吉林农业大学农学院  
【摘要】【目的】构建具有大豆蛋白酶抑制剂BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体,并将其转入根癌农杆菌中,为大豆品质改良奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆大豆蛋白酶抑制剂BBi基因的正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GFP基因片段,分别连入克隆载体pMD18-T Vector中。然后根据植物中ihpRNA原理,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,将组成RNAi载体的4个目的片段分别连入其中,然后利用冻融法转化根癌农杆菌,并进行PCR鉴定。【结果】PCR扩增得到组成RNAi载体的4个目的片段,分别构建成重组克隆载体和ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-G...
【关键词】大豆  蛋白酶抑制剂BBi基因  ihpRNA表达载体  种子特异性启动子
【基金】教育部博士点基金项目(20070193005)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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