截短的小麦冷胁迫反应蛋白基因片段TA3-13的融合表达、纯化与诱导抗TMV功能研究
2010-01-30分类号:S512.1
【部门】南京农业大学植物保护学院/农业部病虫监测与治理重点开放实验室
【摘要】TA3-13是小麦中一个冷胁迫蛋白WCSP1编码基因的5′端截短的DNA序列。它与水稻白叶枯病菌Harpin蛋白的编码基因hpa1_(X∞)(又称hrf1,hrfA)具有59%的一致性。为了研究TA3-13蛋白的生物学性状和功能及其与Harpin蛋白的关系,本研究以pET30a(+)为载体,构建了His融合表达重组体,转化大肠杆菌后在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)和阿拉伯糖的诱导下获得了融合蛋白的表达。利用镍柱对融合蛋白进行了纯化研究,结果表明:融合蛋白在200 mmol·L~(-1)咪唑浓度下能够被有效地洗脱下来,电泳显示具有单一条带。烟草花叶病毒(TMV)接种试验显示:纯化的TA...
【关键词】小麦 TA3-13 His融合表达 纯化 TMV抗性
【基金】国家自然科学基金项目(30671355); 国家973计划项目(2003CB114204); 江苏省科技攻关项目(BE-2005-604)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递