白粉菌诱导的华东葡萄环化cDNA文库中抗病基因筛选
2010-07-23分类号:S432.2
【部门】西北农林科技大学园艺学院/农业部西北园艺植物种质资源与利用重点开放实验室
【摘要】【目的】从环化的中国华东葡萄白河35-1经白粉菌接种诱导后的叶片所构建的cDNA文库中,筛选抗病相关基因序列。【方法】根据植物抗病基因在氨基酸水平上的保守结构域NBS的P-loop区和LRR设计特异引物,采用三维文库筛选法,对环化的葡萄白粉菌接种诱导后的叶片cDNA文库进行PCR筛选。【结果】共建组池24个,每个组池中含有单菌落768个,包含18432个克隆。从中筛选出具有抗病基因保守序列的阳性克隆585个,其中具有NBS保守序列引物筛选出330个,LRR保守序列引物筛选出255个。对获得的阳性克隆中的插入片段进行了测序,经生物信息学分析去除重复序列后,获得422条具有抗病基因保守结构域的基因...
【关键词】华东葡萄 cDNA文库 文库筛选 抗病基因 定量PCR
【基金】国家转基因专项(JY03-A-19-02); 国家自然科学基金项目(30771493)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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