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日本血吸虫Sj CyclophilinA基因的克隆、表达及其生物学功能研究

2010-04-08分类号:Q78

【作者】彭金彪  韩宏晓  洪炀  王欣之  石耀军  傅志强  刘金明  林矫矫  
【部门】中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室  
【摘要】【目的】克隆和表达了日本血吸虫CyclophilinA(Sj CyPA)编码基因cDNA,分析其在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,评估该重组抗原在小鼠体内诱导的抗血吸虫免疫保护效果。【方法】从实验室构建的7天童虫消减cDNA文库中,PCR扩增一EST序列的基因全长cDNA,提交到NCBI,登录号为GQ403666。应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况,以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达。诱导、表达、纯化和复性重组蛋白,测定其PPIase活性。利用Western blot检测重组蛋白的抗原性。以重组抗原免疫小鼠,评估其对小鼠诱导...
【关键词】日本血吸虫  Cyclophilin A(CyPA)  克隆和表达  PPIase活性  免疫保护效果
【基金】国家自然科学基金项目(30671581); 国家“973”项目(2007CB513108); 国家“863”计划(2006AA10A207)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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