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肠出血性大肠杆菌O157:H7Tir基因的克隆、表达及生物学活性研究

2010-06-23分类号:Q78

【作者】张雪寒  何孔旺  茅爱华  周俊明  俞正玉  温立斌  倪艳秀  郭容利  吕立新  
【部门】江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心  
【摘要】【目的】克隆、表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7转位紧密素受体(Tir)基因,并研究其抗原性。【方法】选用pET28原核表达载体,体外构建Tir原核表达重组菌,并在大肠杆菌中获得高效表达。选用家兔制备高滴度多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性。选用HEp-2细胞进行粘附和粘附抑制试验,通过光镜、电镜和荧光显微镜进行观察。选用Balb/c小鼠进行免疫试验。【结果】成功获得高效表达重组Tir蛋白,并制备了兔源Tir多克隆抗体,Western blot分析此抗体能与Tir发生特异性抗原抗体反应。表达Tir蛋白能够抑制O157:H7对HEp-2细胞的粘附和A/E损伤。二免后B...
【关键词】肠出血性大肠杆菌O157:H7  转位紧密素受体  表达  粘附  A/E损伤  免疫保护
【基金】国家“十一五”科技支撑计划(2007BAD40B01); 江苏省农业科技自主创新资金(cx(09)106); 江苏省农业科学院后备人才基金(6510804)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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