RNA干扰南美白对虾白斑病毒VP28基因的体外研究
2010-12-28分类号:S945.46
【部门】广西水产研究所遗传育种与健康养殖重点实验室 广西农业科学院
【摘要】为方便筛选VP28特异性siRNAs,通过构建真核表达载体pEGFP-VP28,然后将设计的siRNA与pEGFP-VP28共转染BHK细胞,并采用Western blotting检测GFP-VP28融合蛋白的表达情况以及半定量RT-PCR检验siRNA抑制VP28转录的效果,建立了体外RNA干扰法筛选系统。结果表明,pEGFP-VP28能在BHK细胞正常表达,设计的3对siRNA对VP28的mRNA转录均有不同程度的干扰效果,其中siRNA2的干扰效果最为显著。研究结论为开展RNA干扰在对虾体内抑制WSSV的研究建立基础。
【关键词】南美白对虾 白斑病毒(WSSV) VP28基因 RNA干扰
【基金】广西科学研究与技术开发计划项目(桂科基0731035,桂科转0896002-9)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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