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双重PCR快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌

2010-08-15分类号:S941

【作者】黎炯  叶星  卢迈新  邓国成  田园园  江小燕  黎坚平  
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所  上海海洋大学水产与生命学院  广东省水产技术推广站  
【摘要】根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16SrRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌...
【关键词】双重PCR  无乳链球菌  海豚链球菌  cfb基因  16SrRNA
【基金】国家科技支撑计划项目(2006BAD01A1201); 现代农业产业技术体系建设专项基金(Nycytx-48-4); 广东省农业重点项目(2009B020201003); 公益性行业(农业)科研专项(3-49); 广东省海洋渔业科技推广专项(A200899B02); 农业部“引进国际先进农业科学技术”项目(2010-C26); 广东省重大科技兴海(兴渔)项目(070103)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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