溶藻弧菌外膜蛋白OmpK基因表达和间接ELISA检测方法的初步建立
2010-10-15分类号：S941
【部门】宁波大学教育部应用海洋生物技术重点实验室
【摘要】溶藻弧菌是中国南部水产养殖业中弧菌病的最主要病原菌,数量居海洋类弧菌之首,其快速检测具有重要意义。以溶藻弧菌国内标准株ATCC17749基因组DNA为模板,PCR扩增出外膜蛋白OmpK基因,将其克隆入表达载体pET-28a中,获得重组质粒pET-28a-OmpK,限制性内切酶结合琼脂糖凝胶电泳分析和序列测定结果表明,该序列开放读码框正确且与已发表的OmpK结构编码序列完全一致。将重组质粒pET-28a-OmpK转化大肠杆菌BL21pLysE,高效表达重组蛋白,将其纯化后免疫小鼠所得的高免血清能外膜蛋白OmpK特异性结合,表明体外表达的重组蛋白OmpK具有良好的免疫原性和反应原性。利用该抗溶藻弧...
【关键词】溶藻弧菌 OmpK基因 原核表达 间接酶联免疫吸附法
【基金】长江学者;创新团队发展计划(IRT0734); 国家科技支撑计划(2007BAD43B08); 浙江省重大国际合作项目(2006C14017); 宁波市重大委托项目(2008C10022)
【所属期刊栏目】水产学报
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