溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaB基因的克隆及原核表达
2010-01-15分类号：S941
【部门】中国科学院南海海洋研究所 广东海洋大学水产学院 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 广东省水产经济动物病害控制重点实验室 中国科学院研究生院
【摘要】参照GenBank上登录的弧菌鞭毛蛋白flaB基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的flaB全长基因,序列分析结果显示该基因为1134bp,编码377个氨基酸。与GenBank中其它弧菌的同源基因序列比对显示,溶藻弧菌flaB基因与副溶血弧菌flaB基因的同源性最高(92%)。将该基因定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出带His-tag的融合蛋白,分子量大小与预期一致。优化的表达条件为28℃,0.4mmol/LIPTG浓度诱导10h。用纯化后的融合蛋白免疫SPF级小鼠,制备了多克隆抗体。Western-blotting结果表明鼠抗...
【关键词】溶藻弧菌 鞭毛蛋白 flaB基因 原核表达
【基金】国家科技支撑计划(2007BAD29B03); 广东省科技重大专项(2004A20401001); 广东省自然科学基金项目(9151064201000063); 广东海洋大学自然科学研究项目(0612187)
【所属期刊栏目】水产学报
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