坎氏弧菌热不稳定溶血素基因的克隆表达、蛋白纯化及其活性
2010-07-15分类号:S941
【部门】中国海洋大学海洋生命学院
【摘要】坎氏弧菌(Vibrio campbellii)是水产养殖动物的重要致病菌。本研究构建了坎氏弧菌热不稳定溶血素(TLH)基因的重组表达质粒pET26b(+)/tlh,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸的TLH融合蛋白,然后利用Ni琼脂糖亲和层析柱进行纯化。SDS-PAGE分析显示,该溶血素能够大量表达,分子量约为42kD。纯化的TLH(0.41mg/mL)具有较强的溶血活性(溶血圈直径为16mm)及磷脂酶活性(晕圈直径为15mm)。其溶血活力的最适温度为37℃,在75℃下培养30min即丧失活力;最适pH为6,pH大于或小于6时都会导致其稳定性下降;一价金属离子如Na+、K...
【关键词】坎氏弧菌 溶血素 TLH 表达 蛋白纯化 溶血活性
【基金】国家自然科学基金委与香港研究资助局(NSFC-RGC)联合科研基金项目(30831160512); 教育部科学技术研究重点项目(108082)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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