尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA的分离及反转录验证
2010-03-15分类号：S917.4
【部门】广西大学动物科学技术学院 广西水产研究所 农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室/中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
【摘要】应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA分离和mRNA浓缩体系。结果显示:获得的总RNA纯度较高,OD260/OD280均在1.9~2.0之间;甲醛变性电泳显示,总RNA完整性良好,28S与18S比值为2∶1;总RNA的分离量与起始白细胞量成正比,每毫升Trizol最大裂解量为1×108个白细胞,可得到总RNA量约为90μg;总RNA的分离量在前四个小时随着沉淀时间的增...
【关键词】尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) 外周血白细胞 总RNA mRNA 冻干浓缩
【基金】国家科技支撑计划课题(2008BADB9B04); 农业部水生动物遗传育种;养殖生物学重点开放实验室开放基金(BZ2007-05); 广西科技计划应用基础研究项目(桂科基0832029)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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