禽脑脊髓炎病毒VP1基因植物表达载体的构建
2010-10-28分类号:S852.65
【部门】河南省农业科学院畜牧兽医研究所 南阳师范学院生命科学与技术学院 南阳市第四职业中等专业学校
【摘要】以提取的禽脑脊髓炎病毒总RNA为模板,以P1和P2为引物,反转录为cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。将扩增产物克隆pMD18-T载体中,获得重组质粒pMD18-T-VP1,PstⅠ/BamHⅠ双酶切及PCR确认正确后,利用pMD18-T-VP1重组质粒为模板,以P3和P4为引物,经PCR扩增获得了大小约810bp的产物。VP1基因和pBI121植物表达载体用SmaⅠ和SacⅠ双酶切,经纯化后连接,再转化到EHA105农杆菌中,酶切和测序鉴定结果表明,成功地构建了重组质粒pBI121-VP1,为进一步利用转基因植物生产VP1蛋白奠定了基础。
【关键词】禽脑脊髓炎病毒 VP1基因 pBI121植物表达载体
【基金】河南省教育厅自然科学研究计划项目(2009B230010)
【所属期刊栏目】华北农学报
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