标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立

2010-08-23分类号:S852.65

【作者】代文君  王洪梅  刘晓  高运东  于力  王立群  仲跻峰  何洪彬  
【部门】山东省农业科学院奶牛研究中心  东北农业大学生命科学学院  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所  
【摘要】【目的】构建口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1,并建立稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。【方法】采用RT-PCR技术从口蹄疫病毒材料中扩增出VP1基因,并将其连入慢病毒载体FG9中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,转染BHK-21细胞,96h后经流式细胞分选筛选GFP阳性细胞,细胞增殖后经WB检测VP1基因的表达。【结果】VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1测序正确,转染BHK-21细胞经流式细胞仪筛选的GFP阳性细胞后可稳定表达VP1基因。【结论】VP1基因重组慢病毒载体构建成功并获得了稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。
【关键词】口蹄疫病毒  VP1  转染  稳定细胞系
【基金】山东省自然科学基金(Y2008D20); 国家转基因重大专项(2009ZX08007-006B); 山东省科技攻关项目(2009GG20002032); 山东省农业重大应用技术创新课题(何洪彬); 兽医生物技术国家重点开放实验室开放基金(SKLVBF200806)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递