卵巢打点注射质粒pIRES2-EGFP生产转基因兔的研究(英文)
2010-10-28分类号:S829.1
【部门】石河子大学动物科技学院 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所 四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所 四川农业大学原子能农业应用研究室 南京晓庄学院生命科学系 河南科技学院动物科学学院
【摘要】本研究以绿色荧光蛋白为报告基因,转染兔卵母细胞,探索建立操作方便、效率高、成本低、可定量生产转基因兔的可行性方法。选择14只成年新西兰雌兔,每侧卵巢内分别打点注射0.25 mL 0.5~0.8 mg/mL的质粒,注射后第3日、第16日和第31日进行人工辅助配种;卵巢注射后第3日、第16日和31日随机各取1只雌兔卵巢做冰冻切片,置荧光显微镜下观察绿色荧光;应用PCR和Southern杂交检测转基因新生仔兔阳性率。结果经荧光显微镜观察,卵巢注射后第3日配种的雌兔卵巢冰冻切片及48 h以后的胚胎呈现绿色荧光;卵巢注射报告基因后第3日配种的雌兔后代阳性率最高,PCR和Southern杂交检测结果分别为...
【关键词】打点注射 卵巢 转基因兔
【基金】The 11th five-year Program of China (2006BAD01All); National Science Foundation of China (30860193); National Hi-Tech imporant Transgenic Program of China (2009ZX08008-001B)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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