茶树ISSR-PCR反应体系的正交优化
2010-08-15分类号：S571.1
【部门】湖南省茶叶研究所 茶学教育部重点实验室 湖南农业大学园艺园林学院
【摘要】对茶树ISSR-PCR反应体系中的5因素(Taq酶浓度(U/(20μL))、Mg2+浓度(mmol/L)、模板DNA质量浓度(ng/(20μL))、dNTP浓度(mmol/L)、引物浓度(μmol/L))在4水平上进行正交优化试验,筛选出各因素的最佳水平,建立茶树最佳ISSR-PCR反应体系,即20μL反应体系中,TaqDNA聚合酶为1.0U/(20μL),Mg2+为2.0mmol/L,模板为40ng/(20μL),dNTP为0.20mmol/L,引物为0.25μmol/L.对茶树ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火试验,确定引物ISSR1、UBC881的最适退火温度分别为52.4、59....
【关键词】茶树 ISSR-PCR 反应体系 正交设计
【基金】国家自然科学基金项目(30671121,30770195)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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