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拟南芥miR395d基因的克隆和过表达载体构建及其在油菜中的转化

2010-03-30分类号:S565.4

【作者】张芸  李会  车丽玲  黄思齐  邱承祥  杨志敏  
【部门】南京农业大学生命科学学院  
【摘要】MicroRNAs(miRNAs)是一类内源性长度约为21~24个核苷酸,在基因表达、生长发育、细胞周期及环境胁迫等方面起着重要作用的单链非编码小分子RNA。研究表明:植物miRNAs通过转录后以切割的方式对其靶基因的表达起着负调控作用。miR395的靶基因分别为ATP硫酸化酶和硫转运体SULTR2;1,两者在硫同化及转运中起着重要的作用。为了进一步探究miR395的功能,本研究利用PCR法从拟南芥中克隆了miR395d前体基因,并与pCAMBIA1304载体连接,构建了miR395d前体基因的过量表达载体,通过根癌农杆菌介导法将其转化到甘蓝型油菜特选4号中,目前已获得了转基因植株。
【关键词】miR395d前体  ATP硫酸化酶  硫转运体SULTR2  1  过表达载体  转基因
【基金】国家自然科学基金项目(30671249); 江苏省自然科学基金项目(BK2006137)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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