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沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定

2010-07-15分类号:Q936

【作者】齐立辉  郑新艳  冉婷婷  徐朗莱  王伟武  
【部门】南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室  
【摘要】为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶。结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50℃温浴1h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1mmol·L-1Zn2+、0.5mmol·L-1草酸和20mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10~20mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200~...
【关键词】草酰乙酸脱羧酶  Na+泵  酶纯化  生化特性
【基金】国家自然科学基金大科学装置联合基金项目(10979028); 国家基础科学人才培养基金项目(J0730647)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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