TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备
2009-05-18分类号：X172
【部门】福建农林大学作物科学学院 福建农林大学生命科学学院
【摘要】提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol.L-1的IPTG进行诱导,提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS-PAGE电泳.并根据融合蛋白特性,利用Ni-NTA Spin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化,经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带.进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原,制备兔抗TeiR多克隆抗体,经ELISA测定该抗...
【关键词】睾丸酮丛毛单胞菌 teiR SDS-PAGE 多克隆抗体
【基金】教育部科学技术重点项目(207056); 福建省自然科学基金资助项目(2008J0041); 福建省教育厅科学技术重点项目(JA06011); 福建省发改委资助项目(闽计投资[2003]170号)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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