贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
2009-10-15分类号:S944.4
【部门】中国检验检疫科学研究院 内蒙古农业大学 福建出入境检验检疫局 黄岛出入境检验检疫局
【摘要】选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101~2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰。利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份。研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。
【关键词】派琴虫 贝类 实时荧光PCR 检测
【基金】国家科技支撑计划(2006BAD06A14); 国家质检总局科研基金(2006IK038)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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