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黑龙江野鲤细菌人工染色体基因组文库构建

2009-03-15分类号:S917.4

【作者】耿波  关云涛  孙效文  
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所农业部北方鱼类生物工程育种重点实验室  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室  
【摘要】为了开展鲤基因组研究,深入研究遗传连锁图谱遗传标记的定位及数量性状的定位和克隆,并最终为分子育种提供服务,本实验构建了鲤的BAC基因组文库。通过采集黑龙江野鲤(Cyprinus caxpio haematopterus)全血细胞制备琼脂糖凝胶包埋块的方法获得了高分子量(HMW)DNA。通过BamHⅠ部分酶切和PFGE电泳分离选择获得100~300kb的DNA片段,用电洗脱和透析的方法对产物进行浓缩和纯化。纯化的HMWDNA连接到大小为7.2kb的克隆载体pEZBAC上。为了评估构建的文库的质量使用一系列引物对文库进行了验证。本研究首次构建黑龙江野鲤的BAC文库,该库含有46656个克隆,插入片...
【关键词】黑龙江野鲤  细菌人工染色体(BAC)  基因组文库  超级池
【基金】国家计划(973)项目“重要养殖鱼类品种改良的遗传;发育基础研究”(2004CB117405); 黑龙江水产研究所基本科研业务费项目“鲤鱼BAC基因组文库克隆”(2007HSYZX-SJ-12)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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