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凡纳滨对虾精氨酸激酶的多克隆抗体制备及组织特异性表达分析

2009-11-15分类号:S917.4

【作者】姚翠鸾  冀培丰  孔鹏  王志勇  
【部门】集美大学水产学院  水产生物技术研究所  福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室  
【摘要】精氨酸激酶(arginine kinase,AK)在调节无脊椎动物磷酸精氨酸与ATP之间能量平衡的过程中具有重要作用。在前期工作基础上,设计特异引物,以凡纳滨对虾肌肉组织cDNA为模版,克隆得到了1071bp的凡纳滨对虾精氨酸激酶的完整开放阅读框;将它克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,转化BL21(DE3)菌株,经诱导后表达出GST-AK融合蛋白。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫小鼠,制备多克隆抗血清,经检测该抗原与抗体识别良好。利用得到的抗体对凡纳滨对虾AK在蛋白质水平上的特异性表达进行分析发现,精氨酸激酶在对虾的肌肉、心脏、神经、血细胞和胃组织中具有高的表达量,而在眼柄、肝胰腺、鳃和皮肤...
【关键词】凡纳滨对虾  精氨酸激酶  多克隆抗体  组织表达
【基金】国家自然科学基金(36071605); 国家“九七三”重点基础发展规划(2006CB101804); 集美大学创新团队基金(2006A001)
【所属期刊栏目】水产学报
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