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猪圆环病毒Ⅱ型抗体间接ELISA检测方法的建立

2009-12-15分类号:S854.43

【作者】李坤  温国元  罗青平  商雨  艾地云  罗玲  王红琳  杨峻  邵华斌  程国富  
【部门】华中农业大学动物医学院  湖北省农业科学院畜牧兽医研究所  
【摘要】建立了检测猪圆环病毒2型血清抗体的间接ELISA方法,并初步应用于临床血清样品的检测。用PCR方法从PCV2 HBZX株中获得截短的核衣壳(capsid,Cap)基因,将该基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-Cap,将该重组质粒转化宿主菌E.coliBL21-CodonPlus(DE3),用IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot鉴定蛋白的正确表达,表达蛋白Cap分子质量为42 ku,可与6×HIS抗体反应;KCl预染切胶纯化目的蛋白,以其为抗原建立检测PCV2感染猪血清抗体的间接ELISA方法。ELISA检测5份血清样品结果变异系数均小于10...
【关键词】猪圆环病毒2型  核衣壳基因  原核表达  间接ELISA
【基金】湖北省科技攻关项目(2007AA402C55)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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