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猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B1蛋白原核表达条件的优化

2009-06-28分类号:S852.7

【作者】王秋霞  张美英  张改平  王选年  宁长申  鲁琨  张龙现  菅复春  
【部门】河南农业大学牧医工程学院  河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室  河南科技学院动物科学学院  
【摘要】研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.2mmol/L的IPTG和200mmol/L的氨苄青霉素在32℃过夜诱导培养,pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白表达量最大,表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的33%。SDS-PAGE表明pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白大小约为33 kDa,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与猪囊尾蚴多克隆抗体...
【关键词】猪囊尾蚴  排泄分泌抗原  Ts8B1蛋白  原核表达
【基金】国家“十一五”国家科技支撑计划(2006BAK02A21)
【所属期刊栏目】华北农学报
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