吕氏泰勒虫cDNA表达文库的构建及其抗原基因的免疫筛选
2009-01-10分类号：S852.7
【部门】中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室
【摘要】【目的】构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表达文库,并从中筛选抗原候选基因。【方法】从吕氏泰勒虫裂殖子直接提取和纯化mRNA,采用oligo(dT)引物合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用PhageMaker extract对连接产物进行体外包装以形成完整的噬菌体,并用之转染大肠杆菌ER1647,从而构建成吕氏泰勒虫的cDNA表达文库。用吕氏泰勒虫阳性血清和兔抗绵羊IgG-AP筛选得到阳性克隆,经测序和Blast软件分析并获得新基因。【结果】成功构建吕氏泰勒虫裂殖子cDNA表...
【关键词】吕氏泰勒虫 cDNA表达文库 构建 免疫筛选
【基金】国家自然资源平台项目(2005DKA21100); 国家自然科学基金项目(30571397,30800820); 国家“863”项目(2006AA10A207); 支撑计划(2007BAD40B00); 国家重点试验室自主申请项目(SKLVEB2008ZZKT019); 中央级公益性科研院所基本科研业务项目(BRF080303); 甘肃省重大专项(0801NKDA033); 中国欧盟合作项目专项
【所属期刊栏目】中国农业科学
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