猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
2009-04-15分类号：S852.65
【部门】中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室
【摘要】以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白(rN蛋白)为抗原,初步建立了检测PRRSV抗体的rN-ELISA方法。根据GenBank公布的PRRSV VR2332株编码核衣壳蛋白的ORF7基因序列设计合成了一对引物,成功扩增出ORF7基因。将其克隆到PET-30a构成原核表达载体,转化宿主菌BL21(DE3)并获得表达。通过SDS-PAGE和Western blot检测证实rN蛋白获得了高效表达,且具有良好的免疫学活性。以纯化的重组蛋白为抗原建立检测PRRSV抗体的间接ELISA法。试验证明,该方法与IDEXX公司生产的PRRSV抗体检测ELISA试剂盒对同批临床血清样本的检测结果完...
【关键词】猪繁殖与呼吸综合征病毒 核衣壳蛋白 ORF7基因 ELISA
【基金】国家科技支撑计划(2006BAD06A14); 实验用小型猪地方标准研究(D07080200720701)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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