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细胞内转录拯救Asia1型口蹄疫病毒

2009-02-10分类号:S852.65

【作者】李平花  白兴文  卢曾军  孙普  郭建宏  李冬  曹伟军  陈应理  刘湘涛  殷宏  刘在新  
【部门】中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室/国家口蹄疫参考实验室  
【摘要】【目的】建立口蹄疫病毒(FMDV)感染性分子克隆的体内拯救技术平台,为深入研究该病毒基因组的结构与功能奠定基础。【方法】将置于T7启动子下的FMDVAsia1/JS/China/2005株全长cDNA的真核重组质粒pFMDV-A经NotI线化后和表达T7RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行病毒体内拯救的研究。【结果】转染细胞盲传第3代48h后出现致细胞病变(CPE),第4代10h出现典型的CPE。RT-PCR、间接免疫荧光、电镜等均检测到了拯救的FMDV,而且存在分子标签,表明构建的FMDV全长cDNA分子克隆在BHK-21细胞内成功包装出FMDV。拯救毒与亲本毒...
【关键词】口蹄疫病毒  感染性分子克隆  病毒拯救  T7RNA聚合酶
【基金】国家“973”项目(2005CB523201)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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