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口蹄疫病毒3D聚合酶B细胞表位的筛选鉴定

2009-06-28分类号:S852.65

【作者】张昱  王永录  张永光  潘丽  方玉珍  刘力宽  蒋守田  吕建亮  张中旺  张淑刚  李正丰  杜进鑫  
【部门】中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室  农业部畜禽病毒学重点开放实验室  
【摘要】以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增3D聚合酶基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,对经凝胶电泳、PCR和EcoRⅠ酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序,通过序列比对获得AF723D聚合酶的核苷酸序列和推导氨基酸序列,综合分析3D聚合酶的亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数,预测其潜在B细胞抗原表位并人工合成表位肽段,利用间接ELISA对潜在表位进行筛选鉴定,结果显示,表位3D2和3D4为病毒株AF72 3D聚合酶的优势B细胞表位,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究奠定基础。
【关键词】口蹄疫病毒  3D聚合酶  间接ELISA  B细胞表位
【基金】国家支撑计划项目(2006BAD06A06)
【所属期刊栏目】华北农学报
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