斑点叉尾鮰疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立
2009-10-15分类号:S941
【部门】华中农业大学水产学院
【摘要】针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍。用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA。该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾鮰疱疹病毒的检测、斑点叉尾鮰暴发性流行病的诊断。
【关键词】PCR-ELISA 斑点叉尾鮰疱疹病毒 敏感性 特异性
【基金】国家自然科学基金(30700624); “十一五”国家科技支撑计划(2006BAK02A22); 农业部948项目(2005-Z37); 华中农业大学科技创新基金资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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