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锯缘青蟹凝集素的提取及单克隆抗体制备

2009-07-15分类号:S917.4

【作者】郝珂  钱冬  刘问  潘清清  
【部门】宁波大学生命科学与生物工程学院  浙江省淡水水产研究所  浙江省三门县海洋与渔业局  
【摘要】凝集素是无脊椎动物非特异性免疫系统的重要组成成份,可凝集外来病原菌、进行非己识别、调理和介导血细胞吞噬。开展了锯缘青蟹血清凝集素的提取、单克隆抗体制备及凝集素定位研究,以N-乙酰基葡萄糖胺(N-Acetyl-D-glucosamine,GlcNac)为配基制备了Sepharose4B亲和层析柱,可选择性结合青蟹血清凝集素;青蟹血清通过亲和层析柱后,以0.45 mol/LNaCl洗脱,得到有较高凝集活性的单一洗脱峰,该洗脱峰凝集素比活为血清凝集活性的32.6倍,SDS-PAGE显示存在87 ku和79 ku主要蛋白成分;以纯化青蟹凝集素免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、单抗筛选获得BF8-2等7...
【关键词】锯缘青蟹  凝集素  亲和层析  单克隆抗体  间接免疫荧光
【基金】浙江省重大科技攻关项目(2005C12038); 浙江省自然科学基金(Y307479)
【所属期刊栏目】水产学报
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