沙冬青脱水素基因的克隆及表达载体的构建
2009-08-28分类号:S793.9
【部门】内蒙古农业大学生物工程学院 内蒙古农牧业科学院
【摘要】为研究沙冬青脱水素的功能,根据沙冬青cDNA文库中脱水素基因序列设计引物,采用PCR技术进行了脱水素基因的扩增,扩增产物与载体pGM-T载体连接,转化大肠杆菌Top10,筛选阳性克隆,测序结果表明,已成功克隆的阳性重组子经测序鉴定其片段大小与已知沙冬青cDNA文库中脱水素基因大小一致,为760 bp,说明此序列无内含子。将成功克隆的阳性重组子提取质粒与pCAMBIA3301质粒同样进行酶切反应,再以T4DNA连接酶连接,成功构建了脱水素基因的植物表达载体,为下一步的抗逆性研究打下了基础。
【关键词】脱水素 克隆 植物表达载体 沙冬青
【基金】内蒙古自治区主席创新基金支持项目(08-03-06)
【所属期刊栏目】华北农学报
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