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猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR鉴别方法的建立与应用

2009-12-10分类号:S852.65

【作者】刘俊  王琴  范学政  徐璐  赵启祖  黄伟  汤波  沙莎  周远成  陈蕾  邹兴启  
【部门】中国兽医药品监察所/国家猪瘟参考实验室  西南大学荣昌校区  
【摘要】【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100~10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nP...
【关键词】猪瘟  荧光定量PCR  TaqMan-MGB  兔化弱毒疫苗
【基金】“十一五”国家支撑计划课题(2006BAD06A12,2006BAD06A18); 北京市自然科学基金(5072041)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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