猪抗病毒蛋白基因重组质粒实时荧光定量PCR标准曲线的建立
2009-04-15分类号:S852.65
【部门】江苏省农业科学院兽医研究所 中国农业大学动物医学院
【摘要】根据GenBank中的猪抗病毒蛋白PKR、OAS/RNase L及Mx核苷酸序列设计特异性引物,经RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞中扩增和克隆了PKR、OAS/RNase L及Mx的101 bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了抗病毒蛋白PKR、OAS/RNase L及Mx标准曲线及其直线回归方程;该方法具有线性关系好,特异性、敏感性、重复性高等特点;建立的荧光定量PCR方法可检测抗病毒蛋白PKR、OAS/RNase L及Mx mRNA水平。为猪体内抗病毒蛋白PKR、OAS/RNase L及Mx的mRNA水平的定量检测提供必要...
【关键词】抗病毒蛋白 外周血单个核细胞 实时荧光定量PCR 重组质粒
【基金】国家“973”计划前期研究专项(2007CB116308); 江苏省自然科学基金(BK2008351)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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