基于荧光熔解曲线模式RT-PCR快速检测H_5N_1亚型禽流感病毒
2009-10-30分类号：S852.65
【部门】西南民族大学生命科学与技术学院 四川省高等院校动物医学重点实验室 中国动物卫生与流行病学中心 中国医学科学院成都输血研究所
【摘要】针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因保守序列设计2对引物,建立了SYBR GreenⅠ双重荧光RT-PCR(RRT-PCR)方法,实现了同一反应管内同时检测AIV的H5和N1亚型基因。熔解曲线分析显示,H5和N1扩增片段的熔解温度分别为(79.5±0.3)℃和(83.3±0.3)℃,无引物二聚体形成,扩增产物片段大小分别为150 bp和474bp,与预期大小相符,测序结果证实为H5和N1亚型基因的靶序列。该方法能从H5N1样本中检出阳性扩增信号,熔解曲线可见H5和N1双特异峰;而H5N2样本有阳性扩增,熔解曲线仅见H5单特异峰。AIV的其他HA亚型和其他病毒的RNA、DNA无扩...
【关键词】禽流感病毒 H5N1亚型 双重荧光RT-PCR 熔解曲线
【基金】国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD06A11)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递
