标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1

2009-08-28分类号:S852.65

【作者】温立斌  何孔旺  杨汉春  郭容利  周俊明  钟书霖  
【部门】江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心  中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点开放实验室  
【摘要】该研究旨在建立快速、敏感和特异的检测类猪圆环病毒因子P1的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法,用于P1的早期诊断。以感染P1的猪血清DNA提取物为模板,采用PCR扩增P1 101 bp的基因片段,将其克隆至pMD18-T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;以阳性质粒为模板,建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测。经测序证实扩增片段属于P1,所建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测P1的反应在101~108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,反应的检出下限为10拷贝/μL,而对猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测为阴性,表...
【关键词】类猪圆环病毒因子  P1  荧光定量PCR  熔解曲线  检测
【基金】国家“973”计划前期研究专项(2007CB116308); 江苏省自然科学基金(BK2008351)
【所属期刊栏目】华北农学报
文献传递