鸡α干扰素基因的克隆、原核表达及抗病毒活性测定
2009-02-28分类号:S852.5;Q78
【部门】河南农业大学牧医工程学院 河南省动物性食品安全重点实验室
【摘要】通过PCR技术从罗曼鸡肝脏基因组中扩增鸡α干扰素(ChIFN-α)全基因,并克隆和测序。序列分析表明,ChIFN-α基因全长为582 bp,亚克隆其成熟蛋白编码基因489 bp,利用基因重组技术构建了重组质粒,使ChIFN-α置于原核表达载体pQE30的T5启动子下并同6×His(多聚组氨酸标签)-Tag融合。经酶切和PCR鉴定,DNA测序证实重组质粒pQEChIFN-α构建正确;将pQEChIFN-α转化大肠杆菌M15感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot证实表达出分子质量为19.80 kDa的融合蛋白。表达的蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性处理后,在Ve...
【关键词】鸡 α干扰素 克隆 原核表达 抗病毒活性
【基金】国家“十一五”科技支撑计划专项(2006BAD06A08)
【所属期刊栏目】华北农学报
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