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一商品猪SLA-Ⅰ分子复合体的体外构建

2009-04-10分类号:S828

【作者】高凤山  李新生  李云岗  郝惠芳  方勤美  夏春  
【部门】大连大学生物工程学院  中国农业大学动物医学院/农业部预防兽医学重点实验室  
【摘要】【目的】研究中国北方杂交商品猪SLA-Ⅰ类分子结构特点,并为进一步的多肽结合等功能研究奠定基础,需要在体外构建正确折叠的SLA-I类分子复合体。【方法】以长白-达兰商品猪为研究材料,克隆SLA-2和β2m。然后采用剪接重叠延伸PCR(splicingoverlapextentionPCR,SOEPCR)法,将SLA-2的胞外区和β2m的成熟肽部分通过一富含甘氨酸/丝氨酸的Linker(G4S)3连接,形成SLA-2-Linker-β2m全长,并插入原核表达质粒pMAL-p2X,转化E.coliTB1,IPTG诱导表达。表达得到的融合蛋白分别经过Western-blot、纯化及FactorXa切...
【关键词】复合体  圆二色谱  SLA-I
【基金】国家自然科学基金项目(30371098); 辽宁省博士启动基金项目(20081078)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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